Performance of rK39-based immunochromatographic rapid diagnostic test for serodiagnosis of visceral leishmaniasis using whole blood, serum and oral fluid

BACKGROUND: The development of rK39-based immunochromatographic rapid diagnostic tests represents an important advance for serodiagnosis of visceral leishmaniasis, being cheap and easy to use at the point of care (POC). Although the use of rK39 have considerably improved the sensitivity and specificity of serological tests compared with total antigens, great variability in sensitivity and specificity was reported. This study aimed at the evaluation of "Kalazar Detect™ Rapid Test, Whole Blood" (Kalazar Detect RDT) for Visceral Leishmaniasis (VL) diagnosis using oral fluid, whole blood and serum specimens collected at different endemic areas of VL of Brazil. METHODOLOGY: To evaluate Kalazar Detect RDT, oral fluid, whole blood and serum specimens from 128 VL patients, 85 healthy individuals, 22 patients with possible cross-reactivity diseases and 20 VL/aids coinfected patients were collected and assayed at the POC. PRINCIPAL FINDINGS AND CONCLUSIONS: The performance of Kalazar Detect RDT in whole blood and serum was similar; however, using oral fluid, the sensitivity was low. Particularly in samples from the city of Natal, Rio Grande do Norte state in Northeastern Brazil, we observed low sensitivity, 80.0% (95% CI: 62.7-90.5), using whole blood and serum, and poor sensitivity, 43.3% (95% CI: 27.4-60.8) with oral fluid. Those values were much lower than in the other regions, where sensitivity ranged from 92.7-96.3% in whole blood and serum, and 80.0-88.9% in oral fluid. Besides, in VL/aids coinfected patients, lower sensitivity was achieved compared with VL patients. In samples from Natal, the sensitivity was 0.0% (95% CI: 0.0-49.0) and 25.0% (95% CI: 4.6-69.9), using oral fluid and serum/whole blood, respectively; in samples from the other regions, the sensitivity ranged from 40.0-63.6% and 80.0-81.8%, respectively. As for specificity, high values were observed across the fluids, 100.0% (95% CI: 96.5-100.0) in whole blood, 96.3% (95% CI: 90.8-98.5) in serum, and 95.3% (95% CI: 89.5-98.0) in oral fluid; across localities, specificity ranged from 85.7-100.0%. Serum samples sent by the collaborating centers to Instituto de Medicina Tropical (n = 250) were tested by Kalazar Detect RDT, Direct Agglutination Test, Indirect immunofluorescence assay, Enzyme-linked immunosorbent assay, and IT-Leish® RDT. The regional difference in the performance of rK39-based RDT and lower sensitivity in Leishmania/HIV coinfected patients raise concern on the routine use of these products for the diagnosis of VL

Zika crisis in Brazil: challenges in research and development.

Infection with the Zika virus (ZIKV) usually causes a mild acute illness, but two major severe syndromes have been described during the epidemic in Brazil: microcephaly and the Guillain-Barré Syndrome. There is now much evidence to show that ZIKV can infect and damage neuronal cells in vitro. In experimental animals, ZIKV has significant neurotropism and can cause brain damage. At present, diagnosis is still a challenge in the field and there is no treatment available. Another major challenge is that one must devise therapies for pregnant women, at all stages of pregnancy. Devising adequate treatment for ZIKV infections represents a challenge that will only be met by the joint effort of the research community.

Assessment of intracanal medications cytotoxicity on L929 fibroblast cells / Avaliação da citotoxicidade de medicamentos intracanais em fibroblastos L929

This study aimed to evaluate the cytotoxicity of intracanal medications on L929 fibroblast cells at different periods of observation. The following experimental groups were studied: calcium hydroxide with camphorated paramonochlorophenol and glycerin (CPG); iodoform with glycerin (IG); calcium hydroxide with iodoform and distilled water (CIW); iodoform with distilled water (IW); calcium hydroxide with distilled water (CW); Otosporin ® (OT); and a control group composed of cells and culture medium. Eluates were prepared from each group and placed in contact with 1 x 105 cells/well for periods of 30 minutes, 12, 24, 48 and 72 hours, 5 and 7 days. After each experimental period, a cytotoxicity test was performed using methyltetrazolium (MTT) and a spectrophotometer at an optical density of 570 nm to analyze cell viability. The ANOVA and Tukey test with a significance level of 5% was used to analyze the data. At 30 minutes and at 12 hours, all groups were equal to the control group. At 24 hours, there was greater cytotoxicity in the IG group than in the control group (P<0.001). At 48 hours, only the OT group was cytotoxic (P <0.001). At 72 hours and at 5 days, the most cytotoxic groups were CW and OT. At 7 days, the IW and CPG groups were the least cytotoxic (P <0.001). With respect to experimental time, significant differences between 24 hours and 7 days were observed in all groups. Otosporin® was the most cytotoxic medication, followed by calcium hydroxide with distilled water.

Este estudo teve como objetivo avaliar a citotoxicidade de medicações intracanais em células L929 de fibroblastos em diferentes períodos de observação. Os seguintes grupos experimentais foram estudados: hidróxido de cálcio com paramonoclorofenol canforado e glicerina (CPG); iodofórmio com glicerina (IG); hidróxido de cálcio com iodofórmio e água destilada (CIW); iodofórmio com água destilada (IW); hidróxido de cálcio com água destilada (CW); Otosporin® (OT); e um grupo controle composto por células e meio de cultura. Os eluatos foram preparados a partir de cada grupo e colocados em contato com 1 x 105 células/poço, por períodos de 30 minutos, 12, 24, 48 e 72 horas, 5 e 7 dias. Depois de cada período experimental, um teste de citotoxicidade foi realizado utilizando metiltetrazólio (MTT) e um espectrofotômetro a uma densidade óptica de 570 nm para analisar a viabilidade celular. A análise de variância e o teste de Tukey com nível de significância de 5% foi utilizado para analisar os dados. Em 30 minutos e em 12 horas, todos os grupos foram iguais ao grupo controle. Em 24 horas, houve uma maior citotoxicidade no grupo IG do que no grupo controle (P<0,001). Em 48 horas, apenas o grupo OT foi citotóxico (P<0,001). Em 72 horas e em 5 dias, os grupos mais citotóxicos foram CW e OT. Aos 7 dias, os grupos IW e CPG foram os menos citotóxicos (P<0,001). Com relação ao tempo experimental, foram observadas diferenças significativas entre 24 horas e 7 dias em todos os grupos. Conclusão: Otosporin® foi o medicamento mais citotóxico, seguido de hidróxido de cálcio com água destilada.

Micronutrients influencing the immune response in leprosy / Micronutrientes que influyen en la respuesta immune en la lepra

La lepra es una enfermedad infecciosa crónica causada por el Mycobacterium leprae, un bacilo intracelular de transmisión aérea. La enfermedad afecta la piel y los nervios periféricos y causa secuelas neurológicas. El bacilo se multiplica lentamente en el hospedador y posiblemente la enfermedad ocurre por el mal funcionamiento de la respuesta inmunitaria del hospedador. Esta revisión aborda el papel de algunos micronutrientes específicos en la respuesta inmunitaria, tales como las vitaminas A, D, E, C, el cinc y el selenio, detallando sus mecanismos de acción en las enfermedades infecciosas y en la lepra. La respuesta inmunitaria a los patógenos libera sustancias nocivas que producen lesión tisular. Esta revisión también aborda cómo una menor cantidad de antioxidantes puede contribuir a un aumento del estrés oxidativo y a complicaciones de las enfermedades infecciosas y la lepra. Puesto que los micronutrientes poseen un efecto regulador de la respuesta inmunitaria innata y adaptativa, es importante un equilibrio perfecto de sus concentraciones para mejorar la respuesta inmunitaria frente a los patógenos (AU)

Leprosy is a chronic infectious disease caused by Mycobacterium leprae, an intracellular bacillus of airborne transmission. The disease affects the skin and peripheral nerves and can cause neurological sequelae. The bacillusmultiplies slowly in the host and the disease probably occurs due to malfunctioning in host immune response. This review addresses the role of some specific micronutrients in the immune response, such as Vitamins A, D, E, C, Zinc and Selenium, detailing their mechanisms of actions in infectious diseases, and in leprosy. The immune response to pathogens releases harmful substances, which lead to tissue damage. This review discusses how a decreased level of antioxidants may contribute to an increased oxidative stress and complications of infectious diseases and leprosy. As the nutrients have a regulatory effect in the innate and adaptative immune responses, a perfect balance in their concentrations is important to improve the immune response against the pathogens (AU)

[Epidemiological characteristics and geographical distribution of schistosomiasis and geohelminths, in the State of Sergipe, according to data from the Schistosomiasis Control Program in Sergipe]. / Aspectos epidemiológicos e distribuição geográfica da esquistossomose e geo-helmintos, no Estado de Sergipe, de acordo com os dados do Programa de Controle da Esquistossomose.

INTRODUCTION: Schistosomiasis is endemic in Brazil, with high prevalence in the State of Sergipe, despite the existence of the Schistosomiasis Control Program (PCE). METHODS: The data from Sergipe's PCE between 2005 and 2008 were surveyed. From the raw information, a database was created on a spreadsheet using the Access software. The frequency and geographic distribution of infections due to Schistosoma mansoni and other intestinal parasites were analyzed. These data were exported to the Spring 5.0.5 software for georeferencing and preparation of thematic maps of the spatial and temporal distribution according to year of evaluation. RESULTS: In 2005, 13.6% (14,471/106,287) of the tests were positive for S. mansoni, 11.2% (16,196/145,069) in 2006, 11.8% (10,220/86,824) in 2007 and 10.6% (8,329/78,859) in 2008. Analysis on the maps showed that there was high prevalence of the disease in Sergipe, and particularly in the municipalities of Ilha das Flores, Santa Rosa de Lima, Santa Luzia do Itanhi and São Cristóvão. Furthermore, we evaluated the association between the frequencies of these parasitic diseases and social and developmental indicators in the different municipalities, according to data from the Brazilian Institute for Geography and Statistics (IBGE) and the Department of Water Resources (SRH). We found that municipalities with schistosomiasis prevalence higher than 15% had lower coverage of sewage systems (hygiene index) (p = 0.05). Additionally, municipalities with hookworm prevalence higher than 10% had lower educational HDI (p = 0.04). CONCLUSIONS: The importance of greater control over environmental risk and educational factors needs to be emphasized in attempts to reduce the prevalence of these parasitic diseases.

Aspectos epidemiológicos e distribuição geográfica da esquistossomose e geo-helmintos, no Estado de Sergipe, de acordo com os dados do Programa de Controle da Esquistossomose / Epidemiological characteristics and geographical distribution of schistosomiasis and geohelminths, in the State of Sergipe, according to data from the Schistosomiasis Control Program in Sergipe

INTRODUÇÃO: A esquistossomose é endêmica no Brasil, com elevada prevalência no Estado de Sergipe, apesar da existência do Programa de Controle da Esquistossomose (PCE). MÉTODOS: Foi realizado levantamento de dados do PCE-Sergipe de 2005 a 2008. A partir da matriz bruta formulou-se planilha de dados no software Access e analisou-se frequência e distribuição geográfica das infecções por Schistosoma mansoni e outros enteroparasitos. Estes dados foram exportados para o software Spring 5.0.5 para georreferenciamento e confecção de mapas temáticos de distribuição espacial e temporal por ano de avaliação. RESULTADOS: Foram positivos para S. mansoni 13,6 por cento (14471/106287) de exames nos anos de 2005, 11,2 por cento (16196/145069) em 2006, 11,8 por cento (10220/86824) em 2007 e 10,6 por cento (8329/78859) em 2008. A análise de mapas mostrou elevada prevalência da doença em Sergipe, em particular nos municípios Ilha das Flores, Santa Rosa de Lima, Santa Luzia do Itanhi e São Cristóvão. Além disso, avaliamos a associação entre as frequências dessas doenças parasitárias com indicadores sociais e de desenvolvimento dos diferentes municípios, de acordo com os dados do Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística (IBGE) e da Superintendência de Recursos Hídricos (SRH). Observamos que os municípios com prevalência da esquistossomose maior do que 15 por cento têm menor concentração de rede de esgotos (índice de higiene); p = 0,05. Adicionalmente, os municípios com prevalência de infecção por ancilostomídeos maior do que 10 por cento apresentam um menor IDH educacional; p = 0,04. CONCLUSÕES: Ressalta-se a importância de maior controle dos fatores de risco ambientais e educacionais, na tentativa de reduzir prevalências dessas doenças parasitárias.

INTRODUCTION: Schistosomiasis is endemic in Brazil, with high prevalence in the State of Sergipe, despite the existence of the Schistosomiasis Control Program (PCE). METHODS: The data from Sergipe's PCE between 2005 and 2008 were surveyed. From the raw information, a database was created on a spreadsheet using the Access software. The frequency and geographic distribution of infections due to Schistosoma mansoni and other intestinal parasites were analyzed. These data were exported to the Spring 5.0.5 software for georeferencing and preparation of thematic maps of the spatial and temporal distribution according to year of evaluation. RESULTS: In 2005, 13.6 percent (14,471/106,287) of the tests were positive for S. mansoni, 11.2 percent (16,196/145,069) in 2006, 11.8 percent (10,220/86,824) in 2007 and 10.6 percent (8,329/78,859) in 2008. Analysis on the maps showed that there was high prevalence of the disease in Sergipe, and particularly in the municipalities of Ilha das Flores, Santa Rosa de Lima, Santa Luzia do Itanhi and São Cristóvão. Furthermore, we evaluated the association between the frequencies of these parasitic diseases and social and developmental indicators in the different municipalities, according to data from the Brazilian Institute for Geography and Statistics (IBGE) and the Department of Water Resources (SRH). We found that municipalities with schistosomiasis prevalence higher than 15 percent had lower coverage of sewage systems (hygiene index) (p = 0.05). Additionally, municipalities with hookworm prevalence higher than 10 percent had lower educational HDI (p = 0.04). CONCLUSIONS: The importance of greater control over environmental risk and educational factors needs to be emphasized in attempts to reduce the prevalence of these parasitic diseases.

Azurexidina, proteína de neutrófilo com funçäo antibiótica: Expressäo, purificaçäo e caracterizaçäo da proteína recombinante / Azurocidin, protein of neutrophilic with function antibiotical: expression, purification and characterization of recombinant protein

Os leucócitos polimorfonucleares têm papel crítico na destruiçäo, digestäo de patógenos, geraçäo e regulaçäo do processo inflamatório. Proteínas que säo estocadas dentro dos grânulos citoplasmáticos têm sido implicadas nos mecanismos microbicidas, independentes de oxigênio, bem como na degradaçäo de proteínas. Os grânulos azurófilos e específicos de polimorfonucleares neutrófilos contêm pelo menos 10 proteínas que podem destruir microorganismos. Dentre estas proteínas, 3 säo serina proteinases: catepsina G, proteinase 3 e elastase. Estas serina proteinases têm atividade antibiótica e também degradam proteínas do tecido conjuntivo. Azurocidina apresenta diversas semelhanças na sequência de aminoácidos e de DNA com as serina proteinases, também possui atividade antibiótica, porém näo apresenta atividade proteolítica, devido a mutaçäoes ocorridas na molécula de DNA, alterando o sítio catalítico típico desta família de proteínas. Esta família de proteínas, incluindo a azurocidina, é denominada de serprocidinas (serina proteinases com atividade microbicida). Azurocidina tem peso molecular de 29 kD e seu DNA codifica 225 aminoácidos da proteína madura e 24 resíduos de aminoácidos do sinal peptídico. O presente trabalho de tese diz respeito à expressäo e produçäo de azurocidina recombinante no sistema de expressäo baculovírus-células de inseto. Azurocidina recombinante expressada e produzida neste sistema foi caracterizada bioquimicamente e sua atividade microbicida conta bactérias Gram negativas e Gram positivas, bem como contra fungo, foi demonstrada. Azurocidina recombinante possui similaridades com a molécula nativa no peso molecular, 29 kD, padräo de glicosilaçäo, ambas possuem manose como resíduo de açucar terminal, sequência N-terminal de aminoácidos e com a atividade microbicida. A LD50 de azurocidina recombinante comtra E. coli, S. faecalis e C. albicans foi 1,2 (mais ou menos) 0,1, 2,9 (mais ou menos) 0,4 e 8,2 (mais ou menos) 0,2 ug/ml, respectivamente e a LD50 de azurocidina nativa foi de 1,3 (mais ou menos) 0,05, 2,3 (mais ou menos) 0,2 e 8 (mais ou menos) 0,8 ug/ml. Também foi demonstrado, com experimentos de deleçäo na molécula de DNA de azurocidina, que as sequências de aminoácidos localizadas entre as posiçöes 114 a 129 e/ou entre 154 a 186, säo necessárias para que azurocidina recombinante seja secretada pelo mio de cultura das células de inseto infectadas com o baculovírus recombinante. Associado a este trabalho de tese, desenvolvemos...

Caracterizaçäo biológica de cepas de Leishmania amazonensis isoladas de pacientes com diferentes formas clínicas de Leishmaniose / Caracteriztion biologic of L. Amazone meuses leishmania ceps isolated of patients from diffuse clinicas forms of leishmaniose

No presente estudo, foi avaliado o comportamento biológico de 5 cepas de L. amazonensis isoladas de pacientes com leishmaniose tegumentar (3 cepas) e leishmaniose visceral (2 cepas). Foram utilizados camundongos isogênicos BALB/c, os quais säo susceptíveis à infecçäo por L. amazonensis, e desta maneira afastamos a interferência da variaçäo genética na determinaçäo da forma de doença. Os animais foram infectados com 5 x 10**6 promastigotas em fase estacionária de cada cepa. Foram realizadas medidas das lesöes das patas semanalmente, visceralizaçäo do parasita com cultivo dos linfonodos popliteos e baços e o peso destes, com 3, 8 e 15 semanas pós-infecçäo, resposta linfoproliferativa das células esplênicas 7 semanas pós-infecçäo, dosagem, dos níveis séricos de IgG, IgG1 e IgG2a anti-leishmania com 3, 7 e 10 semanas pós-infecçäo, além de avaliaçäo do reconhecimento de fraçöes antigênicas com os soros de cada cepa contra o antígeno homólogo e os das demais cepas. O comportamento da infecçäo nas patas dos camundongos BALB/c infectados com as cepas tegumentares foi semelhante ao descrito na literatura. Os animais infectados com as cepas viscerais, tiveram evoluçäo lenta das lesöes até a 15ª semana pós-infecçäo. Os aspectos histopatológicos das lesöes destes animais evidenciaram um padräo semelhante aos descritos para animais resistentes à infecçäo por leishmania, com presença de macrófagos, linfócitos, plasmócitos, formaçäo de granuloma e poucos parasitas no interior de macrófagos. Outro aspecto histológico encontrado foi a miosite e perineurite, até entäo näo descrito na leishmaniose experimental. A disseminaçäo do parasita também foi diferente no grupo de animais infectados com as cepas viscerais em relaçäo ao tegumentar. Só foi observado a presença de leishmania no cultivo dos baços dos animais infectados com as cepas viscerais na 8ª semana pós-infecçäo, enquanto nos infectados com as cepas tegumentares era detectado desde a 3ª semana. Nos animais do grupo tegumentar, os baços aumentaram de peso com o evoluir da doença e no grupo visceral diminuiram. Os níveis séricos de IgG específica para leishmania foi menor no grupo visceral, em relaçäo ao tegumentar, na 10ª semana pós-infecçäo (p < 0,05). O reconhecimento de fraçöes antigênicas também foi diferente entre os soros das cepas tegumentares e os das cepas viscerais. A banda de 63 KD foi a mais reconhecida, e os antígenos maiores do que 63 KD só foram reconhecidas em uma das cepas tegumentares (Teg 3). Os soros das cepas viscerais da 3ª semana pós-infecçäo näo reconheceram nenhuma banda no antígeno homólogo, enquanto reconheceram nos antígenos das cepas tegumentares...

Angiodema hereditário: a propósito de uma família afetada / Angiodema hereditary: apropos of 1 family affected

A partir do diagnóstico de angioedema hereditário em uma paciente, identificamos oito familiares afetados e pudemos confirmar laboratorialmente a doença em três deles. A paciente que motivou o diagnóstico apresentava manifestaçöes de angioedema associado predominantemente aos períodos menstruais, tendo apresentado vários episódios de edema de glote, havendo necessidade de se realizar traqueostomia em quatro ocasiöes. Após iniciar terapêutica com danazol houve diminuiçäo considerável da sintomatologia, bem como um maior espaço de tempo entre as crises. Os dois outros familiares que tiveram laboratorialmente comprovada a diminuiçäo da enzima inibidora de C1 eram filhos da paciente e apresentavam sintomatologia com menor gravidade que a observada na genitora

Quimiodectoma microscópico do pulmäo: estudo histopatológico de caso com cortes seriados / Microscopic chemodectoma of the lung: histopathologic study with sequential sections

O trabalho mostra o estudo, com cortes seqüenciados, de um caso de quimiodectoma microscópico do pulmäo, encontrado como achado incidental em indivíduo portador de congestäo passiva crônica. Há uma variaçäo na apresentaçäo morfológica desta lesäo nos vários cortes, com aspectos que diferem entre o que se considera o início e a parte média do quimiodectoma. A lesäo ao nível mais inicial é muito semelhante ao que foi descrito em outros trabalhos como hiperplasia de quimiorreceptores pulmonares, enquanto na parte média corresponde ao aspecto nodular tumoral descrito pela maioria dos autores